Определение кортизола в слюне. Метод ВЭЖХ-МС.
Определение кортизола в слюне. Метод ВЭЖХ-МС.
Кортизол в слюне: точный анализ методом ВЭЖХ-МС
Кортизол — главный гормон стресса, который участвует в регуляции обмена веществ, иммунного ответа и энергетического баланса. Точный анализ уровня свободного кортизола в слюне позволяет оценить биологически активную форму гормона, не требуя инвазивного заборa крови. В современном лабораторном анализе часто применяется метод ВЭЖХ-МС (в жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией), который обеспечивает высокую специфичность и чувствительность, минимизируя перекрестные реакции и погрешности, связанные с матрицами биологического материала. В этой статье мы разберём, зачем нужен этот анализ, как проводится забор слюны, как интерпретировать результаты и какие факторы на них влияют.
Что исследуем и зачем
Кортизол в слюне представляет собой свободную фракцию гормона, не связанного с белками крови. Именно эта форма активна в тканях и целевых органах. За счет дневной динамики секреции и биоритмов организма слюна как биоматериал отражает суточную вариацию уровня гормона более непосредственно, чем плазма крови. Неинвазивный характер забора делает этот тест удобным для повторных измерений и мониторинга состояния надпочечников, реакций на стресс, коррекции терапии, а также для обследования детей и пожилых людей, которым кровь может быть затруднительно сдавать.
Преимущества слюны как биоматериала
Использование слюны как источника гормона имеет ряд преимуществ. Во‑первых, забор можно провести вне клиники, в домашних условиях, при условии соблюдения инструкции. Во‑вторых, образец слюны менее подвержен дневной колебательной динамике по сравнению с плазмой крови и позволяет получить информативный результат без риска внутривенного доступа. В‑третьих, анализ LC-MS обеспечивает превосходную специфичность по отношению к кортизолу и его близким метаболитам, что важно, если во время отбора биоматериала есть влияние лекарственных препаратов или пищи на спектр других веществ.
Метод ВЭЖХ-МС в лабораторной диагностике
Лабораторная методика с применением жидкостной хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МС, часто LC-MS/MS) позволяет точно идентифицировать и количественно определить кортизол в слюне. Этот подход минимизирует методические погрешности и способен разделять кортизол от близких по структуре метаболитов и примесей слюны. В результате получают числовое значение концентрации в единицах измерения, которые напрямую соотносятся с физиологическим статусом пациента. Такая методика особенно полезна при необходимости сопоставления результатов со стероидными профилями, мониторинге ответной реакции на стрессовые воздействия и выявлении гипокортицизма или гиперкортицизма.
Подготовка к забору образца
Чтобы результат был достоверным, важна надлежащая подготовка к забору слюны. Основные принципы включают:
- избегать приема пищи и напитков за 30–60 минут до сбора,
- воздержаться от курения и употребления кофе за несколько часов до анализа,
- исключить прием препаратов, которые могут повлиять на уровень кортизола (по возможности и по инструкциям врача),
- не гасить слюну голодом и не использовать средства для полости рта, которые могут содержать вещества, влияющие на анализ,
- если забор выполняется дома, обеспечить чистоту образца и стерильность контейнера; перед сбором рекомендуется прополоскать рот чистой водой и подождать несколько минут.
Соблюдение этих правил снижает риск ложноположительных или ложноотрицательных результатов и обеспечивает более точное определение концентрации свободного кортизола в слюне.
Процедура сбора образца
Образец слюны обычно собирают в стерильный контейнер объемом около 1–2 мл. Предпочтительно использовать пассивное слюноотделение или сертифицированные устройства для сбора слюны, чтобы минимизировать слюноотделяемые примеси. После сбора образец отправляют в лабораторию для анализа LC-MS с целью количественного определения кортизола. Время между сбором и анализом должно быть минимальным или образец должен быть правильно сохранён — хранение на холоде или в соответствии с инструкциями лаборатории позволяет сохранить стабильность гормона в слюне.
Нормальные значения и интерпретация результатов
Нормальные значения кортизола в слюне зависят от времени суток, возраста и ряда индивидуальных факторов. Утренняя концентрация обычно выше дневной, но диапазоны могут существенно варьироваться у разных лабораторий и методов анализа. При интерпретации результатов важно учитывать:
- временной момент забора (часто рекомендуется утро, после пробуждения, когда пик кортизола наиболее часто фиксируется);
- дневной профиль уровня гормона при необходимости повторных замеров;
- влияние стресса, болезней, изменений сна, приема лекарственных средств;
- индивидуальные нормы, формируемые конкретной лабораторией на основе валидированных норм для используемого метода.
При повышении уровня кортизола в слюне могут рассматриваться различные состояния: синдром Иценко‑Кушинга, гиперактивация оси гипоталамус–гипофиз–надпочечники в ответ на стресс, воспалительные процессы, эндокринные нарушения и др. При снижении уровня гормона возможны нарушения функций надпочечников и гипоталамо-гипофизарной системы, ряд форм гипопитуитаризма и другие состояния, требующие дополнительного клинического обследования. В любом случае трактовку результатов должен осуществлять квалифицированный специалист с учётом клинической картины и данных других исследований.
Показания к проведению анализа
Такие направления часто определяют необходимость анализа кортизола в слюне методом ВЭЖХ-МС:
- оценка активности оси гипоталамус–гипофиз–надпочечники;
- мониторинг кортизоловой динамики при стрессе, депрессивных расстройствах и тревожных состояниях;
- обследование на гипер- и гипокортицизм, подозрения на синдром Иценко–Кушинга или болезнь Аддисона;
- контроль эффективности терапии гормонотерапией или противоопухолевыми препаратами, когда их влияние на кортизол может быть значительным;
- оценка суточной динамики в условиях изменённого графика сна и часов поясов.
Как читают результаты: что говорят цифры пациенту
Результаты анализа кортизола в слюне следует рассматривать не как единое число, а как часть клинико-лабораторной картины. Важны не только абсолютные значения, но и тренд: изменение в течение дня, различия между условиями (утро/вечер), сопоставление с анамнезом и симптоматикой пациента. Повышение может говорить о стрессе, нарушениях надпочечников, нарушениях суточного ритма; снижение — о гипопитуитаризме или Аддисоновой болезни. В отдельных случаях требуются дополнительные тесты для подтверждения диагноза, такие как гормональные тесты, функциональные пробы, визуализация органов и другие лабораторные параметры.
Что важно знать пациенту после анализа
После получения результатов пациенту полезно обсудить с врачом не только цифры, но и образ жизни: режим сна, степень хронического стресса, физическую активность, рацион и потребление кофеина. LC-MS обеспечивает надёжную детекцию и может быть повторена для мониторинга динамики во времени. При необходимости врач может скорректировать терапию, план обследования или дать рекомендации по изменению образа жизни, чтобы стабилизировать уровень гормона в организме.
Часто задаваемые вопросы
- Можно ли сдавать анализ дома? — Да, при наличии подходящего устройства для сбора слюны и инструкции лаборатории, однако точность зависит от соблюдения всех условий забора и хранения образца.
- Нужна ли специальная подготовка к анализу? — Обычно рекомендуется избегать факторов, которые могут повлиять на уровень кортизола за 24 часа до забора: стресс, недосыпание, тяжелые физические нагрузки, употребление кофе и алкоголя, курение; конкретные требования уточняются у вашей лаборатории.
- Есть ли альтернативы слюне? — Для оценки свободного кортизола можно использовать плазму крови или мочу; выбор зависит от клинической задачи и доступности лабораторного метода.
- Как часто можно повторять тест? — Частота определяется клиникой в зависимости от целей обследования; повторные пробы могут потребоваться для динамического мониторинга.
Заключение
Анализ кортизола в слюне с использованием метода ВЭЖХ-МС представляет собой мощный инструмент для неинвазивной оценки активности оси гипоталамус–гипофиз–надпочечники и состояния стресс-реакции организма. Такой подход обеспечивает высокую точность и воспроизводимость, а также позволяет получать репрезентативный суточный профиль гормона без дискомфорта для пациента. При правильной подготовке к забору образца, сопоставлении результатов с клиническими данными и учете индивидуальных факторов можно получить ценную информацию для диагностики, мониторинга и коррекции лечения. Если вам необходима достоверная оценка уровня свободного кортизола в слюне, обсудите с врачом возможность проведения исследования по методу ВЭЖХ-МС и уточните требования к сдаче образца в выбранной лаборатории.
Запишитесь на приём в «Медальянс» онлайн
Оформите запись на приём через сайт в удобное для вас время. Мы подтвердим заявку и подберём подходящее время визита без звонков, очередей и лишних ожиданий.