Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56 (Lymphocyte Phenotyping: CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56)

Краткое описание исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

Лимфоциты составляют 20-40% от всего числа лейкоцитов, относятся к агранулоцитам (не содержат гранул в цитоплазме), представлены гетерогенными субпопуляциями клеток, которые не отличаются по морфологии, но несут на поверхности разные специфические рецепторы (молекулы, называемые кластерами дифференцировки), и выполняют различные функции. В числе таких функций: распознавание различных антигенов благодаря экспрессии на поверхности клеток уникальных антигенных рецепторов, формирование гуморального иммунного ответа к чужеродным белкам путем синтеза антител (иммуноглобулинов различных классов), обеспечение клеточного иммунитета − уничтожение разных клеток непосредственно эффекторными цитотоксическими лимфоцитами (отторжение трансплантата, противоопухолевый иммунитет, иммунитет против внутриклеточных паразитов, в том числе противовирусный). Часть лимфоцитов является клетками памяти, которые сохраняют информацию о ранее встречавшемся антигене.Кластеры дифференциации лимфоцитовЛимфоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. Эти структуры при иммунофенотипировании лимфоцитов являются антигенными маркерами различных субпопуляций лимфоцитов, присутствие которых определяют с помощью флуорохром-меченых моноклональных антител, что позволяет определить их количественное содержание с применением поточной цитофлюометрии. Поверхностные антигенные структуры на клетках, выявляемые моноклональными антителами, назвали кластерами дифференциации (CD, Clusters of Differentiation).Кластерам дифференциации в целях стандартизации присвоены определенные номера. Используя флуорохром-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно определить содержаниея лимфоцитов, относящихся к различным по функциям или стадии развития субпопуляциям. Это позволяет понять природу некоторых заболеваний, оценить состояние пациента, следить за течением заболевания и прогнозировать его дальнейшее развитие.Характеристика основных субпопуляций лимфоцитовТ-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они происходят из клеток-предшественников костного мозга, которые мигрируют в тимус для созревания, селекции и последующего экспорта на периферию, участвуют в обеспечении клеточного иммунного ответа и контроле работы В-лимфоцитов, ответственных за образование антител (гуморальный иммунный ответ). Т-клетки координируют различные аспекты адаптивного иммунитета на протяжении всей жизни, включая реакцию на патогены, аллергены и опухоли.Т-хелперы (от англ. to help – помогать) представляют собой разновидность Т-лимфоцитов и несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками. Участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины.Цитотоксические Т-клетки распознают фрагменты антигена на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в область контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.В-лимфоциты (от лат. bursa – сумка, по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты делятся и дифференцируются в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.ЕК-клетки (естественные киллерные клетки, или натуральные киллеры) – клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически измененным клеткам-мишеням. ЕК-клетки не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам. EKT-клетки – это клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.При интерпретации результатов оценки содержания субпопуляций лимфоцитов важно обращать внимание на их абсолютное количество.Специфические кластеры дифференциации антигеновCD3 – поверхностный маркер, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. CD3 является корецептором Т-клеточного рецептора (TCR), отвечающего за распознавание процессированных антигенов, связанных с молекулами главного комплекса гистосовместимости. CD3 необходим для экспрессии TRC на клеточной поверхности и обеспечивает передачу сигнала внутрь клетки. CD4 характерен для хелперных Т-клеток. Экспрессируется также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Он связывается с молекулами MHC класса II (Major Histocompatibility Complex; главный комплекс гистосовместимости 2 класса), которые находятся на антигенпрезентирующих клетках, облегчая распознавание пептидных антигенов.CD8 характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, ЕК-клеток, большей части тимоцитов. Это рецептор Т-клеточной активации, который облегчает распознавание клеточно-связанных антигенов MHC класса I.CD16 используется вместе с CD56 преимущественно для идентификации ЕК-клеток. Представлен также на макрофагах, тучных клетках, нейтрофилах, некоторых Т-клетках. Это компонент рецепторов, связанных с IgG, опосредующих фагоцитоз, продукцию цитокинов и антителозависимую клеточную цитотоксичность.CD19 присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках, считается самым ранним маркером B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-клеток.CD56 – прототипный маркер ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток, присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD56-позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD56-негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гомофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

С какой целью выполняют Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56

Фенотипирование с количественным определением содержания основных субпопуляций лимфоцитов применяют в целях скрининговой оценки общего иммунного статуса, в том числе, в комплексных исследованиях при первичных иммунодефицитах, лимфопролиферативных заболеваниях (при которых характеристика лимфоидных клеток с точки зрения происхождения предоставляет врачу ценную информацию для прогноза и определения соответствующей терапии), ВИЧ-инфекции, аутоиммунных заболеваниях, а также для оценки изменений при иных видах патологии, которые могут стать причиной вторичных иммунодефицитов, и мониторинга состояния и контроля терапии пациентов с иммунодефицитными, аутоиммунными состояниями, пациентов после трансплантации органов и пр.