Подсчет количества тромбоцитов под микроскопом

Подсчет количества тромбоцитов под микроскопом

Подсчет количества тромбоцитов (PLT) — это ключевой анализ для оценки свертывающей системы крови, выявления тромбоцитоза (повышения) или тромбоцитопении (снижения).

Ключевые аспекты:

1. Когда проводится? Анализ назначается при диагностике нарушений гемостаза, кровоточивости, необъяснимых синяках, а также для контроля during беременности и лечения химиотерапией.

2. Роль тромбоцитов. Кровяные пластинки, отвечающие за формирование тромба и остановку кровотечения при повреждении сосуда. Их дисбаланс ведет к риску тромбозов или кровотечений.

3. Диагностика. Проводится в рамках общего клинического анализа крови (ОАК) на автоматическом гематологическом анализаторе, реже — ручным методом в счетной камере. Забор крови — из вены или пальца.

4. Практический вывод. При значимых отклонениях от нормы (см. таблицу) необходимо срочно обратиться к терапевту или гематологу для комплексного обследования (коагулограмма, УЗИ, миелограмма).

5. Группы риска.  Люди с аутоиммунными заболеваниями, онкологией и беременные.

Анализ на тромбоциты — обязательный тест для оценки риска кровотечений или тромбозов, требующий обязательной врачебной интерпретации.

Источники:

1. Sylvain Audia, Matthieu Mahévas, Maxime Samson, Bertrand Godeau, Bernard Bonnotte Pathogenesis of immune thrombocytopenia (2017).

2. Клинические рекомендации Минздрава РФ «Диагностика и лечение тромбоцитопений» (актуальная редакция).

Подробнее об этом — ниже:

Подсчет общего числа тромбоцитов крови проводится путем микроскопического исследования, которое позволяет обнаружить нарушение реологических свойств крови в виде тромбоцитопении (снижение уровня тромбоцитов) или тромбоцитоза (повышение уровня тромбоцитов).

Правила подготовки пациента:

1. Накануне анализа исключить физические нагрузки и моральное напряжение.
2. Запрещено употребление спиртных напитков и наркотических средств, следует ограничить курение.
3. Ужинать до 21.00, обязательно исключить острую, жареную и жирную пищу.
4. Забор крови проводится утром натощак перед выполнением других медицинских процедур (УЗИ, рентген и физиотерапии).
5. Перед анализом обязательно сообщить врачу о принимаемых лекарственных препаратах, так как они могут повлиять на результат исследования.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериал: Цельная кровь
• Синонимы (rus): кровяные пластинки, бляшка Биццоцеро.
• Синонимы (eng): Platelet Count, Thrombocyte, Thrombocyte count, PLT.
• Сроки выполнения: 1 день 

Важно: Специалисты рекомендуют проводить мониторинговое исследование крови в одной и той же лаборатории. В разных лечебных центрах используются различные методики, аналитические аппараты и тест-системы, именно поэтому результаты анализа могут интерпретироваться по-разному.

Разновидности методик подсчета общего числа тромбоцитов:

• Методика подсчета по Фонио;
• Определение количества при помощи камеры Горяева;
• Автоматизированная техника подсчета (используя гематологический автоанализатор).

Показатель нормы: 180-320 тыс. тромбоцитов

Что такое тромбоциты, их строение и функция

Тромбоциты представляют собой мелкие клетки дисковидной формы, лишенные ядра – именно поэтому они получили название кровяных пластинок. Их объем варьирует от 5 до 10 мкм³, диаметр – от 2 до 5 мкм. Благодаря своей способности к адгезии и агрегации (скупчиванию и склеиванию друг с другом) они участвуют в процессах гемокоагуляции и фибринолиза – свертывания крови и растворения тромбов. Их мембрана используется в качестве транспортера циркулирующих иммунных комплексов (образовавшихся в результате взаимодействия чужеродного антигена и специфических антител), энзимов, антикоагулянтов, фибриногена и биологически активных веществ. Гранулы кровяных пластинок содержат один из основных нейро-медиаторов – серотонин, факторы свертывающей системы, ионы кальция, аденозиндифосфат.

Структура тромбоцита состоит из трех зон:

1. Периферической, наружная поверхность которой покрыта рецепторами, ферментами, гликопротеинами и плазматическими факторами, необходимыми для активации клеток – мембранным фосфолипидным фактором III, фосфолипазой, арахидоновой кислотой и пр. Их недостаток вызывает чрезмерную кровоточивость.
2. Золя-геля, прилегающей к нижней части периферической зоны – вдоль нее расположен сократительный аппарат клетки, который представляет собой кольцо микротрубочек.
3. Внутриклеточных органелл – плотных гранул, содержащих кальций, норадреналин, серотонин, аденозинтрифосфат, адреналин и аденозиндифосфат, которые обеспечивают регуляцию сокращения тромбоцитов, их склеивания, секреции и активации вазоконстрикторов (веществ, вызывающих сужение сосуда и уменьшающих кровоток) и тромбоцитарного ростового фактора (полипептида, стимулирующего восстановление стенки сосуда).

Благодаря своим свойствам тромбоциты поддерживают целостность стенки сосуда – при его повреждении они мгновенно закупоривают проблемное место временной гемостатической пробкой, а затем принимают участие в формировании постоянного тромба, предотвращающего избыточную кровопотерю. При тромбоцитопении снижается устойчивость капиллярной стенки – легкие травмы или изменения кровяного давления провоцируют появление на кожных покровах точечных кровоизлияний (петехий), вызванных слущиванием эндотелиального слоя сосудов. В организме здорового человека за устранение этого дефекта несет ответственность реакция освобождения гранул – активация тромбоцитами содержащихся в них биологически активных веществ.

Тромбоциты обладают анти-паразитарной активностью – при проникновении в человеческий организм трематод (сосальщиков – паразитических плоских червей, поражающих внутренние органы) кровяные пластинки способны поражать гельминтов, оказывая на них цитотоксический эффект.

Метод подсчета тромбоцитов по Фонио

Кровяные пластины хорошо окрашиваются специальными реагентами, в зависимости от степени зрелости их оттенок имеет различную интенсивность – это используется для дифференцировки морфологической структуры клеток. Наиболее распространенным способом их подсчета является метод Фонио. Его суть заключается в микроскопическом исследовании мазков крови, окрашенных недорогими реагентами (раствором эозин-метиленового синего или эозиновыйм красителем Гимзы). В полях зрения сетки микроскопа параллельно подсчитывают количество эритроцитов и тромбоцитов. 

Этот метод приобрел популярность не только из-за низкой себестоимости и простоты выполнения – его можно осуществить даже спустя несколько часов, а то и дней после отбора образца биологического материала, что имеет важное значение для уточнения и сравнения полученных показателей.

Что означают результаты?

Тромбоцитоз (увеличение численности кровяных пластинок) может иметь первичный характер (результат эритремии, эссенциальной тромбоцитемии, миело-лейкоза) и вторичный – возникать на фоне массивной кровопотери, гемолиза, спленэктомии (удаления селезенки), чрезмерного физического напряжения или какой-либо патологии:

• туберкулеза;
• системного воспалительного процесса;
• остеомиелита;
• лимфогранулематоза;
• гипернефромы (злокачественного поражения почки);
• опухолевидных образований желудка;
• полицитемии;
• цирроза печени;
• железодефицитной анемии;
• системной красной волчанки;
• мегакарицитарного лейкоза;
• ревматоидного артрита;
• сепсиса.

Значительный тромбоцитоз (когда количество клеток доходит до 800 тыс.) способствует более активной адгезии пластинок и повышенному тромбо-образованию.

Тромбоцитопения (снижение количества клеток) является неблагоприятным прогностическим признаком, свидетельствующим о повышенном риске кровоточивости и увеличении длительности кровотечения. Это явление может быть обусловлено повышенным использованием клеток и высокой скоростью их разрушения, что ассоциировано с врожденными аномалиями (синдромами Фанкони, Вискотта-Олдрича, Бернара-Сулье, Чедиака-Хигаси, Мея-Хегглина), медикаментозным поражением костного мозга (длительным применением сульфаниламидных, нестероидных противовоспалительных и цитотоксических препаратов), интенсивными гемотрансфузиями, искусственной перфузией и приобретенными патологиями:

• аутоиммунной тромбоцитопенической пурпурой;
• соединительнотканными заболеваниями (дерматомиозитом, склеродермией, системной красной волчанкой);
• бактериальными и вирусными инфекциями (гриппом, токсоплазмозом, корью, малярией, краснухой, риккетсиозом, ветряной оспой);
• вирусными гепатитами;
• циррозом печени;
• апластической, мегалобластной либо миелофтизной анемией;
• гипотиреозом;
• тиреотоксикозом;
• ДВС-синдромом;
• болезнью Маркиафавы-Микели;
• тромбозом печеночных вен;
• застойной сердечной недостаточностью.

Уменьшение числа тромбоцитов до 20 тыс. приводит к возникновению спонтанных кровотечений и жизне-угрожающих состояний, до 5 тыс. – к смерти пациента.